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脫氫酶(DHA)測試盒可見分光光度法

簡要描述:脫氫酶(DHA)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:虎紅鈉鹽瓊脂進口、國產Rose Bengal Agar250克生物制品真菌、酵母菌計數沙氏瓊脂進口、國產Sabouraud′s Agar250克用于真菌檢測改良沙氏瓊脂進口、國產Sabouraud′s Agar,Modified250克真菌檢測沙氏液體進口、國產Liquid Sabourand Medium250克真菌、酵母菌增菌培養

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-11
  • 訪  問  量:968

詳細介紹

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:脫氫酶(DHA)測試盒可見分光光度法

產品規格:50管/48樣

檢測方法:可見分光光度法

產品貨號:BK-01S6944

產品分類:其它系列
商品介紹:

測定意義:

脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶,催化底物通過細胞色素系統被氧化,釋放的能量供機體使用,是生物體取得能量的一種方式。

測定原理

在細胞呼吸過程中,氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脫氫酶作用下接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現紅色,于485nm測定其吸光值,即得脫氫酶活性。

自備實驗儀器及用品

天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、甲醇(不允許快遞,請用戶自備)。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1%NaCl蔗糖  20支

2 ug pYES4NT/C pYES4NT/C 低溫運輸,-20℃保存

50次 M13噬菌體單鏈基因組DNAout  

2 ug pET-24a(+) pET-24a(+) 低溫運輸,-20℃保存

PBS緩沖液(PH7.4) PBS Solution 250g

1瓶 4647細胞株 4647 低溫運輸和保存

1盒 無內毒素槍頭,1 mL  

24 T 一氧化氮合成測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH6.5   MES Buffer,1.0M,pH6.5   常溫保存

250ug lambda(λ) DNA(不含N6-甲基腺) Lambda DNA(λ DNA) -20℃保存

2 ug pQE-40 pQE-40 低溫運輸,-20℃保存

脫氫酶(DHA)測試盒可見分光光度法IKBKE/IKKi  核因子κB抑制蛋白E抗體 規格: 0.1ml

DECR1  線粒體2,4-雙烯酰輔A還原1抗體 規格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr249)  磷酸化原基因c-Jun抗體 規格: 0.1mlphospho-G3BP1(Ser232)  磷酸化Ras GTP活化蛋白結合蛋白1抗體 規格: 0.1ml

Paxillin  樁蛋白Paxillin抗體 規格: 0.1mlCECR6  貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規格: 0.2ml

REG1β/REG1 beta  胰島細胞再生因子β抗體 規格: 0.2mlASAM/ACAM  脂肪細胞特異性粘附分子抗體 規格: 0.1ml

CTRP1/G protein coupled receptor interacting protein 1  G蛋白偶聯受體相互作用蛋白1抗體(補體Clq TNF相關蛋白1) 規格: 0.2mlId1  DNA結合抑制因子1抗體 規格: 0.2ml

SLC27A1  鏈脂肪酸轉運蛋白1抗體 規格: 0.2mlDR6/CD358  瘤細胞調亡素/瘤壞死因子受體死亡受體6抗體 規格: 0.2ml

PDZD6  PDZ結構域PDZK6蛋白抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗猴IgG 規格: 0.1ml

NCF/NCF4/p40phox  嗜中性粒細胞胞漿因子4抗體 規格: 0.1mlCK I alpha/STK  絲/蘇蛋白質激抗體Casein kinase Ⅰα(CKⅠα) 規格: 0.1ml

SIRT6  沉默調節相關蛋白6抗體 規格: 0.2mlphospho-ERK5(Ser496)  磷酸化細胞外信號調節激5抗體 規格: 0.1ml

TSPAN2  四分子交聯體2抗體(四旋蛋白) 規格: 0.2mlMyelin PLP  髓磷酯髓鞘蛋白1抗體 規格: 0.2ml

JMJD2A/KDM4A/JHDM3A  組蛋白去甲基化JMJ2A抗體 規格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA  核突觸蛋白α抗體 規格: 0.1ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

 


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