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亞鐵氧化酶(HP)測試盒微量法

簡要描述:亞鐵氧化酶(HP)測試盒微量法公司正在出售的產品:安德雷德氏糖類肉湯進口、國產Andrade,s Carbohydrate Broth250克細菌的糖發酵試驗OF進口、國產HLGB250克細菌的氧化發酵試驗EYA基礎進口、國產Egg Yolk Agar Medium Base250克肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌的分離培養強化梭菌鑒別瓊脂進口、國產DRCA250克食品和其他物質中梭菌的計數和培養

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-13
  • 訪  問  量:579

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

Hephaestin (HP)作為銅藍蛋白的同系物,是近年來發現的鐵轉運蛋白亞鐵氧化酶,HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內鐵代謝。HP的表達可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調節。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介導鐵的跨膜轉運中有重要作用。

測定原理:

HP催化Fe2+氧化為Fe3+,Fe2+ferrozine反應顯色,在560 nm下有特征吸光值。通過測定Fe2+的減少速率可測得亞鐵氧化酶的活性。

自備用品:

可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

亞鐵氧化酶(HP)測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6957

11.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250mL Zinc-Fixative  Zinc-Fixative  常溫保存

10mL 去垢劑去除樹脂 Detergent Erasol Resin 常溫保存

2 ug pVL1392 pVL1392 低溫運輸,-20℃保存

500次 一管式植物DNAout One-Tube Plant DNAOUT 常溫

2 ug pET-3d pET-3d 低溫運輸,-20℃保存

10mL RNase-free 水 RNase-free Water 常溫

1瓶 95-D細胞株 95-D 低溫運輸和保存

50T 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒 Classical Swine Fever Virus RT-PCR Kit 低溫運輸,-20℃保存

25 T 超微量ATP測試盒(測Ca2+ATPase) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

50mL Lithium Chloride Solution(氯化鋰溶液),1M  Lithium Chloride Solution,1M  常溫保存

50次 通用型RT-LAMP試劑盒 Universal RT-LAMP Kit -20℃保存

亞鐵氧化酶(HP)測試盒微量法Myt1  髓鞘轉錄因子1抗體 規格: 0.2ml

THYN1  胸細胞核蛋白1抗體 規格: 0.2ml

Hexokinase 3  己糖激3抗體 規格: 0.2ml

TSSC3  瘤抑制轉移候選基因3抗體 規格: 0.2ml

EGF  小鼠抗表皮生因子抗體 0.1ml

Septin 2/Sept2/NEDD5  神經前體細胞表達發育下調蛋白5抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Cy5  Cy5標記的兔抗羊IgG 規格: 0.1ml

Neurexin 1  軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體 規格: 0.2ml

CD141/THBD  凝調節蛋白/栓調節素抗體 規格: 0.1ml

Collagen XI alpha 2  膠原蛋白11A2抗體 規格: 0.2ml

PSD95  突觸后密度蛋白95抗體 規格: 0.1ml

phospho-NTRK2/TrkB (Tyr515)  磷酸化酪激B抗體 規格: 0.1ml

 


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