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可溶性酸性轉化酶(SAI)測試盒微量法

簡要描述:可溶性酸性轉化酶(SAI)測試盒微量法公司正在出售的產品:艾格瓊脂 英文名稱:Eugonic Agar 產品規格:250g TM培養基 英文名稱:Thayer Martin Agar 產品規格:250g YNB培養基 英文名稱:YNB Medium 產品規格:100g 硫細菌培養基 英文名稱:Medium-sulfur bacteria 產品規格:250g

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:750

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

蔗糖轉化酶(InvertaseIvr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據最適 pHIvr分為酸性轉化酶(AI)和中性轉化酶(NI)兩種類型。                          

AI的最適pH35AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AIB-AI)兩種類型。S-AI主要存在于細胞液泡或自由空間中,最適 pH 4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗糖,調節液泡中蔗糖的利用和果實內糖類的積累。

測定原理:

S-AI催化蔗糖降解產生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內510nm光吸收增加速率與S-AI活性成正比。

自備用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

可溶性酸性轉化酶(SAI)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6709

11.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

10塊 LB平板培養基(無抗生素) LB Petri Dish 低溫

2 ug pPIC 3.5 pPIC 3.5 低溫運輸,-20℃保存

棉子糖-雙岐桿菌鑒定  20支

2 ug pBMN-IRES-GFP pBMN-IRES-GFP 低溫運輸,-20℃保存

TCBS瓊脂 Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 250g

1g 氯化金 Gold(Ⅲ)Chloride   室溫密封保存

50T 艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

50g 干粉  

2 ug pBlueScript SK(+) pBlueScript SK(+) 低溫運輸,-20℃保存

100mL DNTris HCl,1M,pH9.0  

2 ug pFLD-cat Z+ pFLD-cat Z+ 低溫運輸,-20℃保存

可溶性酸性轉化酶(SAI)測試盒微量法LAMP2/CD107B  溶體相關膜蛋白2抗體 規格: 0.1ml

PCNA  增細胞核抗原抗體 規格: 0.1ml

GSK-3 Beta (CT)  葡萄糖合成激-3β抗體 規格: 0.1ml

E-cadherin/CD324  上皮鈣粘附分子抗體 規格: 0.1ml

Phospho-Doublecortin (Ser297)  磷酸化雙皮質素抗體 規格: 0.1ml

BKCA alpha  鈣激活鉀通道蛋白α抗體 0.2ml

Mouse Anti-rat IgG/PE  PE標記的小鼠抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

5-HTR3  5-羥色胺受體3抗體 0.1ml

TAP2/ABCB3  ATP結合轉運因子2抗體 規格: 0.2ml

UBR2  泛素蛋白連接E3α2抗體 規格: 0.2ml

Styk1  絲/蘇/酪激STYK1抗體 規格: 0.2ml

FAS/Apo-1/CD95  載脂蛋白1抗體 規格: 0.1ml

 


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