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當(dāng)前位置:首頁   >  產(chǎn)品中心  >  生化檢測試劑盒  >  氮代謝系列  >  NO含量測試盒可見分光光度法

NO含量測試盒可見分光光度法

簡要描述:NO含量測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:四號(hào)瓊脂 英文名稱:No.4 Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g CC瓊脂添加劑 英文名稱:CC Agar Supplement 產(chǎn)品規(guī)格:1ml*5支 纖維二糖-E(CC)瓊脂 英文名稱:Cellobiose-polymyxin E Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 精雙水解試驗(yàn)用培養(yǎng)基(AD) 英文名稱:Aaginine dehydrolase

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-28
  • 訪  問  量:1198

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測,7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號(hào)

NO含量測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6489

商品介紹:

測定意義:

NONitric OxideNO)廣泛分布于生物體內(nèi)神經(jīng)、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經(jīng)組織中較豐富。它作為細(xì)胞間及細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì),發(fā)揮信號(hào)傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機(jī)體的生理、病理過程中起著重要的作用。

測定原理:

NO在體內(nèi)或水溶液中極易氧化生成NO2—,在酸性條件下,NO2—與重氮鹽磺酸胺生成重氮化合物,進(jìn)一步與萘基乙烯基二胺偶合,產(chǎn)物在550nm處有特征吸收峰,測定其吸光值,可以計(jì)算NO含量。為了排除樣品色素等的影響,每個(gè)樣品需做對(duì)照管。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、研缽或勻漿器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

醇類中和劑管(帶棉簽)  10ml*20

1瓶 IAR20細(xì)胞株 IAR20 低溫運(yùn)輸和保存

無菌采樣袋(45cm*55cm) Sterile Homogeneous Bag 50個(gè)/包

5mg 熒光素標(biāo)記的 FITC-Biotin -20℃保存

250mL Sodium Citrate Buffer(檸檬酸鈉緩沖液),0.5M, pH5.5   Sodium Citrate Buffer,0.5M, pH5.5   常溫保存

1 管 XL blue大腸桿菌 XL1-Blue E.coli Strain -80℃保存

2 ug pSH47 pSH47 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 柱式真菌RNA-DNA雙提試劑盒  

2 ug pCMS-EGFP pCMS-EGFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

亞硫酸鹽瓊脂 Sulfite Agar 250g

5g L-  L-Ornithine 室溫干燥避光保存

NO含量測試盒可見分光光度法TRIM31  環(huán)指蛋白HCG1抗體 規(guī)格: 0.2ml

EpCAM/CD326  上皮特異性抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

TLR2/CD282  Toll樣受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml

ITM2A  完整膜蛋白E25A抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCDH18  原鈣粘附蛋白18抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Tau protein(Ser235)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

CNP/CNPase  C型鈉尿肽抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)  磷酸化5-脂氧合抗體 0.1ml

Goat Anti-Bovine IgG/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml

CPSA(C2F9)  復(fù)合前列特異性抗原單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml

His tag(CT)  聚組抗體g標(biāo)簽抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml

CHCHD2  丙型NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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