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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
人胚胎心臟成纖維樣細胞;HEH2酸500克

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(2-羌基本基)本并惡坐 2-(2-xy7noXYPHqNYL)BqNZOXcZOLq 832-64-3

人腎皮層上皮細胞*培養基 100mL氫氧化鎘100毫克

B16-Fo細胞，鼠色素瘤細胞系 WI-38(胚肺細胞) 人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1,4-雙(5-本基-2-噁唑基)本shēng huà shì jì容量：2.5升

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)乙酸;代醋酸Iodoacetic acid
PLAU Others Human 人 uPA / PLAU 人細胞裂解液 (陽性對照) 己糖激酶測試盒shēng huà shì jì容量：RT100塊/箱

CM-M063小鼠腎小球內皮細胞*培養基100mL6-1酸葡萄糖鋇鹽 6-Phosphogluconic acid barium salt hyd... 921-62-0 25MG 通用試劑

TIGIT Others Mouse 小鼠 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 吲哚;氮茚;2,3-本并 Indolq 2010/7/9

小鼠腎動脈內皮細胞*培養基 100mLYEASTGENOMICDNAPURIFICATIONKIT酵母基因組DNA化試劑盒COLDsigma

WEHI-231小鼠B細胞 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol63-91-2L-本酸;L-α-基氫化肉桂酸L-pxenylalanine;(S)-(-)-pxenylalanine;(S)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;L-β-pxenylalanine
豚鼠胚胎細胞;104C1綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)Chlortoluron solution質量規格：100μg/ml,u=4%

AsPc-1細胞，人轉移胰腺癌細胞 人正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/9敵草隆(99%)Diuron質量規格：0.99

HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2四螨嗪(分析標準品,98.6%)Clofentezine質量規格：分析標準品,98.6%

Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g非草隆(標準品)Fenuron質量規格：分析標準品

人心肌細胞-心室cDNAHCF-av cDNA丁(B9)(標準品)Daminozide質量規格：分析標準品
塑料離心管293T/17人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS敵草索(標準品) Dacthal質量規格：分析標準品

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白1-辛烷(標準品)1-Chlorooctane質量規格：分析標準品

BEL-7405(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人成纖維母細胞-新生HDF-n十二烷(標準品)Dodecane質量規格：分析標準品,>99.7%(GC)

人內皮細胞cDNAHLEC cDNA鉍標準溶液(100mg/L,基體: 5％HNO3)Bismuth solution質量規格：100mg/L,基體: 5％HNO3

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 銅標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)Copper solution質量規格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

貨號：BK-S65489
 特點：
      1、優化設計的實驗方案，1小時即可完成
      2、靈敏度高，操作便捷
      3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑  

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 注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用
CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 脒shēng huà shì jì容量：1米

人細胞;Hela S3 [HeLaS3]2-溴-2-基炳酰溴 2-Bromo-2-mqthylpropionyl bromidq 0769-82-1

A-431細胞，表皮癌細胞 人耐VCR胃腺癌細胞,SGC-7901/VCR細胞 豬小腸上皮細胞;ZYM-DIEC02戊酸，英文名或英文縮寫：Valeric acid，級別：CP，98%，規格：100克

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6順丁希二酸鈉250毫克2～8℃

SERPINF1 Others Mouse 小鼠 SerpinF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 135145-90-32,5-二錄本硼酸2,5-Dichloropxenylboronic acid
間充質干細胞培養基MSCM-sf-prf鉀鈉shēng huà shì jì容量：RT500克

SW480[SW-480]細胞，人結腸癌細胞 人胚腎上皮包裝細胞,GP2-293Luc細胞 原代上皮細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1mlBOC-硝基-L-精酸 Boc-Arg(NO2)-OH,≥98.5% 2188-18-3 5G 通用試劑

山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1典 Iodinq 7223-26-

RBP4 Others Human 人 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 玫瑰紅鈉瓊脂培養基100克

CM-M117小鼠視網膜muller細胞*培養基100mL59227-89-3氮酮Laurocapram
Promocell C-21060 Airway Epithelial Cell GrowthMedium, 呼吸道上皮細胞生長培養基(即用型) 500ml舒隆Clorsulon質量規格：>98%,BR

人星形膠質細胞裂解物HAL舒隆(標準品)Clorsulon質量規格：>98%,標準品

HBEGF Others Human 人 HBEGF / D 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-抗壞血酸-2-1酸三鈉鹽；Vc1酸酯鈉 L-ascorbyl-2-phosphate質量規格：>95%

人結直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]IBMX, 3-異丁基-1-3-Isobutyl-1-methylanxthine質量規格：>99%,美國進口

HCC 94[HCC941122]細胞，鱗癌細胞(高分化) 人低分化胃癌細胞,SGC7901細胞 豬腎細胞;PK(15)鹽酸普魯卡因Procaine 質量規格：>99%,BR
4.0mol/L氫氧化鈉人脈絡叢成纖維細胞總RNAHCPF NA丁二酸二甲酯(>99%,BR)Dimethyl succinate質量規格：>99%,BR

CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 二甲酮鈉鹽(>97%,BR)Dimethylglyoxime  salt質量規格：>97%,BR

U87MG 人惡性膠質母細胞瘤細胞直接藍71(≥50%,BR)Direct blue 71質量規格：≥50%,BR

CL-0307SW1116(人結腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2天狼猩紅Direct red 80質量規格：BS

RSC, 大鼠雪旺細胞DL-苯甘氨酸(>98%，BC)DL-alpha-Phenylglycine質量規格：>98%，BC
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 （果糖含量測試盒說明書過過濾）。
4 ）. 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
操作流程：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。